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[试剂耗材] 无载体RNA,超强大的尿液游离RNA提取试剂盒

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发表于 2019-4-22 17:08:21 | 显示全部楼层 |阅读模式
有研究发现,尿液游离RNA(cf-RNA)包含有助于发现某些癌症类型以及监测疾病状态的有价值信息。任何传染性病原体外泌体可以在唾液,血液,尿液,羊水和恶性腹水以及其他生物体液中发现。这些外泌体可能在介导对感染因子和肿瘤的适应性免疫应答,组织修复,神经传递和致病蛋白的转移中起作用。

                               
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如何从收集与保存的尿液样本中分离出游离RNA(cf-RNA)呢?艾美捷比较推荐Norgen Biotek的尿液游离RNA提取纯化试剂盒:Urine Cell-Free Circulating RNA Purification Mini Kit  56900;其特色与优势如下:
1. 分离所有大小的游离和外泌体RNA,包括microRNA;
2. 多种尿液输入量(250μL-30 mL);
3. 没有苯酚提取物;
4. 没有载体RNA;
5. 结合并洗脱所有RNA,无论大小或GC含量如何,无偏差;
6. 将游离的RNA和外泌体RNA浓缩至灵活的洗脱体积,范围为50μL至100μL;
7. 短时间内纯化高质量的RNA。
厂家测试结果:
从不同体积的新鲜尿液中纯化cf-RNA和外泌体RNA。然后将2ul纯化的RNA用作RT-qPCR反应中的模板,以评估(A)5S rRNA转录物和(B)miR-21的扩增。(A)5S rRNA转录物和(B)miR-21的平均Ct值随着上样量的增加而线性降低。

                               
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检测人miR-21时在cf-RNA样本中存在的抑制剂含量检测。使用Norgen试剂盒从不同体积尿液中分离cf-RNA。在20μL的qPCR反应中使用不同的洗脱体积,以观察Ct值的变化。随着PCR上样量的增加,Ct值趋于降低,表明使用Norgen试剂盒从尿液中纯化的cf-RNA不含尿液中的常见抑制剂。

                               
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Norgen尿液游离RNA提取纯化试剂盒能够从1 mL尿液中回收96%的5S rRNA转录物。此外,从2mL尿液中回收了96%的5S rRNA转录物。对于miR-21,Norgen试剂盒能够从1mL尿液中回收92%的miR-21。此外,从2mL尿液中回收100%的miR-21。

                               
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