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[结核病] 传统结核病药敏试验 VS 新型药敏试验

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发表于 2013-10-31 11:06:51 | 显示全部楼层 |阅读模式
传统结核病药敏试验 VS 新型药敏试验

       耐药结核病患者或耐药高危人群的发现和治疗应建立在一整套策略的基础上。在一套合理和系统的实验室操作过程中,体外药物敏感试验起着关键的作用。本指南强烈建议加强国家结核病防治规划对耐药结核病可疑者提供药敏试验的能力。这些建议见于WHO及其伙伴的《结核病关怀国际标准》,以及2007年世界卫生大会通过决议要求在2015年普及药敏试验。
       药敏试验有不同的技术。传统表型法是在含抗结核药物培养基中进行结核分枝杆菌培养,观察后者生长是否受到抑制。表型法测定耐药不需要考虑机制或分子学基础。表型法药敏试验可以在固体培养基上直接或间接进行。在直接试验中,浓缩的痰标本直接接种到含有药物和不含药物的培养基里。而间接试验中,将痰培养出的菌落进行接种。间接表型法已被广泛认可,是诊断的金标准。通常有三种方法:比例法、绝对浓度法和抗性比率法。跨国参比室的几轮熟练度测试显示对于一线抗结核药物,这三种方法的药敏结果没有差别。二线药物的药敏试验,对肉汤或液体培养法与固体培养基的比例法进行了研究,绝对浓度法或固体培养基的抗性比率法还不确定。当前人们大多关注于药敏试验方法学的可靠性和重复性,不同方法学的临界浓度见《WHO二线药敏试验的合理使用政策指南》。
       基因型法检测的是耐药基因,而不是耐药的表型。大多数基因法包括两步:第一,核酸分子扩增法,如聚合酶联反应(PCR),扩增结核分枝杆菌基因组片段(耐药菌株中已知的改变)。第二,评估扩增的产物(扩增子),了解耐药相关的特殊突变。
       快速耐药诊断新技术正在得到开发。大多数还处在初级阶段,正在进行实验室的评估或进行初期的大范围研究,评估他们的可行性、成本效益。最突出的是代表MDR-TB的利福平快速耐药检测技术。在大多数情况下,特别是在使用一线抗结核药物固定剂量复合剂的地方,耐利福平几乎都合并耐异烟肼。确定利福平耐药也就意味着极可能是MDR-TB(尽管并非全部)。利福平快速耐药检测的优点包括早期鉴定不合理一线药物方案患者、快速筛查出MDR-TB可疑者以及尽早预防MDR-TB的传播。
       实验室研究发现,几个利福平快速耐药检测试验是有效的。建议在MDR-TB(包括HIV高负担)流行的地方使用利福平快速耐药检测方法。然而,确诊MDR-TB的传统药敏试验方法仍被认为是金标准,以足够的实验室能力来确保MDR-TB诊断仍然是最基本的要求。
       目前还没有快速诊断XDR-TB的分子学检测方法,传统的、新的液体药敏试验技术仍是诊断XDR-TB最可靠的方法。一些新的液体及琼脂培养技术能在14天内确诊XDR-TB。

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